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张杰

张杰

军事医学科学院
总发文数 29 H指数 8 总被引次数 150

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1. 1.318 μm近红外激光对皮肤损伤效应的研究

【中文期刊】 杨在富 钱焕文 张宁 单清 张杰 马萍 陈鹏 杨景庚 梁洁 王嘉睿 康宏向 高荣莲 

《中国激光医学杂志》 2007年16卷2期 69-74,133-134页 被引6次 ISTICCA

【摘要】 目的 研究1.318 μm近红外激光对皮肤的损伤效应,确定损伤阈值并观察损伤修复情况.方法 以普通白色仔猪为实验动物,以输出波长1.318 μm的Nd:YAG激光照射猪躯干两侧皮肤.损伤阈值实验时以肉眼可见红斑反应为判定标准,于照后即刻观察皮肤红斑发生率,采用加权概率单位法计算红斑发生率为50%时所对应的激光剂量,即损伤阈值ED50.损伤修复观察实验所用激光剂量均高于损伤阈值,于照后即刻至49 d观察皮肤损伤修复情况.结果 1.318 μm激光致仔猪皮肤损伤的阈值剂量为9.2J/cm2.随着激光剂量的提高,皮肤损伤反应依次表现为暂时性红斑反应、持续性红斑反应、白色凝固斑、淡褐色(炭化)凝固斑.损伤修复所需的时间依次为数分钟、数天、十余天、数十天.结论 1.318 μm激光可致仔猪皮肤损伤的阈值剂量ED50为9.2J/cm2.激光剂量越高,皮肤损伤越重,修复所需时间越长.

【关键词】 激光皮肤损伤阈值

2. 1.318 μm近红外激光视网膜损伤阈值研究

【中文期刊】 杨在富 钱焕文 张宁 单清 张杰 马萍 陈鹏 杨景庚 梁洁 王嘉睿 

《中国激光医学杂志》 2006年15卷2期 79-82页 被引6次 ISTICCA

【摘要】 目的研究1.318μm激光对视网膜的损伤效应,确定其损伤阈值.方法用输出波长1.318 μm的Nd:YAG激光为照射光源,固定照射时间0.2 s,以不同剂量的激光照射散瞳后的家兔(25只)和大鼠(28只)眼睛,照射光斑直径分别为5 mm和2 mm,于照后1 h和24 h观察视网膜损伤发生率,用加权概率单位法计算损伤发生率为50%时所对应的激光剂量,即损伤阈值ED50.并于照后24 h对损伤视网膜做病理切片观察.结果1.318 μm激光致家兔和大鼠视网膜损伤的阈值角膜剂量分别为13.7 J/cm2和10.4 J/cm2,阈值角膜能量分别为2.69 J和0.33 J.受损视网膜可见清晰的白色凝固斑,损伤重者累及视网膜全层.结论1.318μm激光可导致家兔和大鼠视网膜损伤,损伤阈值ED50分别为13.7 J/cm2和10.4 J/cm2.

【关键词】 激光视网膜损伤阈值

3. 独家脉冲Nd:YAG激光对单层KB细胞损伤效应的研究

【中文期刊】 陈虹霞 杨在富 张杰 杨景庚 单清 高光煌 钱焕文 

《激光生物学报》 2005年14卷1期 12-16页 被引1次 ISTICCA

【摘要】 目的:观察脉冲Nd:YAG激光照射体外单层培养KB细胞后的形态改变及损伤后HSP70, c-Fos的表达情况,初步探讨较强脉冲激光对细胞的损伤效应及损伤修复机制.方法:建立单层培养细胞的脉冲Nd:YAG激光损伤模型,每个脉冲能量密度为160 J/cm2~186 J/cm2或220 J/cm2~257 J/cm2,分别于照后即刻、2 h和6 h,用台盼蓝染色、TUNEL检测分析该激光对KB细胞的损伤特点,免疫组化法检测HSP70, c-Fos的表达水平.结果:当照射剂量为220 J/cm2~257J/cm2时,照后即刻,光斑中央细胞形态严重破坏,直接坏死;周围细胞形态未发生明显改变.2 h后周围细胞TUNEL着色也增强,呈强阳性.照后6 h光斑中央及周围细胞着色均减弱.TUNEL着色区直径随时间先扩大后缩小.当照射剂量为160 J/cm2~186 J/cm2时,细胞内HSP70、c-Fos表达随时间先显著增强,而后减弱至正常.结论:脉冲Nd:YAG激光在所选剂量下,可以引起单层KB细胞的损伤,包括即刻坏死、延迟性死亡及可逆性损伤.HSP70、c-Fos的高表达说明它们在保护受损细胞、修复激光所致损伤中发挥重要作用.

【关键词】 细胞损伤c-FosHSP70

4. 重组人TNF-α在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学活性研究

【中文期刊】 何江 张杰 

《中国优生与遗传杂志》 2004年12卷6期 28-30页 被引3次 ISTIC

【摘要】 目的探讨优化通过大肠杆菌表达重组人TNF-α的相关条件,改良纯化策略,为使用噬菌体随机肽库技术筛选抗TNF-α特异小分子肽提供纯度高活性好的靶蛋白. 方法将表达质粒pUC118- TNF-α转化入大肠杆菌,对表达条件进行优化后进行大量表达.再先后使用SP-FF阳离子交换层析柱和Q-FF阴离子交换层析柱对重组人TNF-α蛋白进行纯化.应用Western blot和细胞测活分别检测重组人TNF-α蛋白的抗原性和细胞毒活性.结果为筛选TNF-α特异性结合肽通过大肠杆菌高效表达出纯度高活性好的重组人TNF-α靶蛋白.

【关键词】 大肠杆菌TNF-α

5. 脑源性神经营养因子基因转导对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响

【中文期刊】 赵连旭 张杰 孟玲 曹丰 王冬梅 南雪 李艳华 王韫芳 徐小虎 裴雪涛 

《中华医学杂志》 2004年84卷24期 2115-2117页 被引2次 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 <篇首> 动物实验表明骨髓间充质干细胞(MSC)移植到脑组织中可长期存活,并可向包括神经元在内的神经细胞分化[1,2].但MSC移植也面临一个问题:移植细胞多分化为胶质细胞,分化为神经元的数量较少.本研究旨在观察外源基因转入MSC后,持续稳定高表达的脑源性神经营养因子(BDNF)对MSC向神经细胞分化的作用.

6. 骨髓间充质干细胞在激光损伤大鼠视网膜下分化的观察

【中文期刊】 张杰 单清 马萍 姜严明 陈鹏 温静霞 周游 钱焕文 裴雪涛 

《中华医学杂志》 2003年83卷22期 1993-1998页 被引27次 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的鉴定骨髓间充质干细胞(MSC)在体外不诱导的条件下移植于掺钕钇铝石榴石(Nd:YAG)激光损伤大鼠视网膜后的定位以及蛋白表达情况.方法体外培养大鼠MSCs,用荧光染料4′,6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记MSCs, 视网膜下移植后分别于10、20、35和 50 d处死动物,做DAPI荧光观察,并在阳性的连续切片上作神经元核(NeuN), 神经元特异性烯醇化酶(NSE), 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和角蛋白(CK)免疫组化染色及HE染色.分别于损伤前及损伤后即刻、1~7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电图(ERG)b波分析.结果培养的MSC集落生长迅速,均一性好;DAPI染色观察表明,10 d时移植细胞多集中于移植部位周围,但分布散乱;20 d时可见阳性细胞分布范围扩大,分布于视网膜视锥、视干细胞层、双极细胞层及节细胞层;到35 d阳性细胞范围进一步扩大,且细胞向损伤部位迁移; 50 d观察损伤范围与35 d相比扩大不明显.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN、NSE、GFAP和CK 的表达有不均一性.检测到的阳性区域视网膜未见到玫瑰花结样结构,但某些区域的细胞排列不整齐,在某些部位有细胞层增生.HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组,ERG b波检测表明5周后损伤移植组的b波水平高于对照组.结论 MSC在视网膜下移植后可与原视网膜结构相融合,检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,但细胞的排列和蛋白表达仍有紊乱.MSC的移植对激光损伤斑及ERG b波的恢复有促进作用.

【关键词】 干细胞视网膜激光

7. Q型人血清对氧磷酶在杆状病毒感染的昆虫细胞中的表达

【中文期刊】 滕霞 朱洁 武军华 张杰 王淑豪 池木根 邵宁生 秦浚川 孙曼霁 

《中国药理学与毒理学杂志》 2003年17卷2期 131-135页 被引2次 ISTICPKUCSCDCAEMBase

【摘要】 目的研究对氧磷酶与心血管疾病的关系.方法采用BAC-TO-BAC杆状病毒系统表达Q型人血清对氧磷酶(PON-1),在已获得人PON-1全长cDNA的基础上,通过PCR扩增,得到上游含EcoRⅠ酶切位点,下游不含终止密码子而含HindⅢ酶切位点的PON-1基因,将其克隆到带有6×His@Tag的pFASTBACⅡCD14质粒中,构建杆状病毒转移载体pFASTBACⅡ-PON-1.将含有PON-1基因的重组质粒pFASTBACⅡ-PON-1转化DH10BAC感受态细胞,使目的基因通过同源重组插入Bacmid DNA中.PCR鉴定正确后再转染入sf9昆虫细胞中,产生有感染力的重组杆状病毒.用乙酸苯酯为底物测定表达上清液中的酶活性.结果比较不同感染复数(MOI)和不同感染时间PON-1在培养上清液中的表达情况,确定感染复数MOI为6~8,感染时间96~108 h为PON-1的最佳表达条件,产率约为4.5 mg@L-1上清液.免疫印迹法表明重组蛋白有与抗6×His单克隆抗体结合的抗原性.顺磁共振实验证明,基因工程产人重组血清对氧磷酶rhPON-1能有效清除Fe2+诱导亚油酸脂质过氧化产生的脂质自由基,清除率为55.9%.结论BAC-TO-BAC杆状病毒介导的草地贪夜蛾昆虫细胞sf9可高效表达Q型人血清对氧磷酶.

【关键词】 基因重组对氧磷酶杆状病毒科

8. 独家Nd:YAG激光致视网膜感光细胞损伤及相关基因的表达

【中文期刊】 姜严明 陈鹏 张杰 单清 马萍 张翠萍 钱焕文 

《激光生物学报》 2003年12卷4期 296-301页 被引13次 ISTICCA

【摘要】 目的:观察兔眼视网膜激光损伤后不同时间点感光细胞的改变以及相关基因的表达变化.方法:北京青紫蓝灰兔随机分为正常对照组和激光损伤组,在调Q倍频Nd:YAG激光损伤后不同时间采用超微结构观察、凝胶电泳、TUNEL染色、原位杂交(ISH)以及Northern blot等方法检测了感光细胞损伤特点并分析相关基因的表达改变.结果:电镜、核酸电泳和TUNEL结果表明视网膜感光细胞照射后出现明显的凋亡特征,在伤后不同时间,其分布和强度都有改变.而杂交结果表明c-fos和bax在照后表达增强,尤其以照后第1天为最,而bcl-2和p53在损伤后无明显改变.结论:大量感光细胞的凋亡是临床上低剂量倍频Nd:YAG激光致视网膜损伤、视功能下降的主要机制.c-fos和bax基因的表达可能介导了视网膜细胞凋亡的过程.

【关键词】 激光视网膜损伤

9. 利用噬菌体肽库筛选脂多糖的模拟表位

【中文期刊】 董洁 高亚萍 张杰 柳川 薛沿宁 

《军事医学科学院院刊》 2003年27卷4期 271-273页 被引3次 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:利用噬菌体肽库获得脂多糖的模拟表位.方法:用脂多糖免疫大耳白兔获得抗血清,从中纯化抗脂多糖的多克隆抗体.以纯化的抗体IgG为筛选靶分子,对噬菌体随机十二肽库进行亲和筛选.经3轮筛选后,随机挑取25个克隆测序,并进行噬菌体ELISA结合实验及脂多糖竞争抑制实验,以确定阳性克隆.结果:获得12种序列,ELISA实验结果显示其中6个为阳性克隆,且经脂多糖竞争抑制实验进一步证实.结论:获得了6个脂多糖的模拟表位,为脂多糖抗原表位的研究及疫苗研究提供了线索.

【关键词】 脂多糖噬菌体随机肽库模拟表位

10. 大鼠骨髓间充质干细胞视网膜下移植观察

【中文期刊】 张杰 单清 马萍 姜严明 陈鹏 钱焕文 裴雪涛 

《眼科新进展》 2003年23卷2期 82-85页 被引13次 ISTICPKUCA

【摘要】 目的鉴定骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜下移植后的定位.方法体外培养雄性大鼠MSCs,直接作为细胞供体视网膜下移植于成年雌性大鼠视网膜下,4周后将动物处死,取眼球做石蜡切片,用Y染色体鉴定;为做进一步验证,将MSCs用重组腺相关病毒AAV-gfp感染后移植,分别于4、8周取动物眼球作冰冻切片,于荧光显微镜下做绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)表达观察.结果培养的MSCs集落生长迅速,均一性好;Y染色体原位杂交鉴定表明来源于MSCs的阳性细胞融合入了原来的视网膜结构,在光学显微镜下可分布于视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层;在荧光显微镜下可见GFP标记的阳性细胞存在,分布于视网膜色素上皮层、视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层,细胞形态与结构同周围的视网膜相似;2种标记方法检测到的视网膜结构完整,未见到玫瑰花结样结构.结论 MSCs可在视网膜下移植后4周与原视网膜结构相融合,2种方法检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层.

【关键词】 骨髓间充质干细胞视网膜Y染色体