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姜严明

姜严明

军事医学科学院
总发文数 8 H指数 4 总被引次数 68

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期刊论文:2003年
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1. 骨髓间充质干细胞在激光损伤大鼠视网膜下分化的观察

【中文期刊】 张杰 单清 马萍 姜严明 陈鹏 温静霞 周游 钱焕文 裴雪涛 

《中华医学杂志》 2003年83卷22期 1993-1998页 被引26次 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的鉴定骨髓间充质干细胞(MSC)在体外不诱导的条件下移植于掺钕钇铝石榴石(Nd:YAG)激光损伤大鼠视网膜后的定位以及蛋白表达情况.方法体外培养大鼠MSCs,用荧光染料4′,6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记MSCs, 视网膜下移植后分别于10、20、35和 50 d处死动物,做DAPI荧光观察,并在阳性的连续切片上作神经元核(NeuN), 神经元特异性烯醇化酶(NSE), 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和角蛋白(CK)免疫组化染色及HE染色.分别于损伤前及损伤后即刻、1~7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电图(ERG)b波分析.结果培养的MSC集落生长迅速,均一性好;DAPI染色观察表明,10 d时移植细胞多集中于移植部位周围,但分布散乱;20 d时可见阳性细胞分布范围扩大,分布于视网膜视锥、视干细胞层、双极细胞层及节细胞层;到35 d阳性细胞范围进一步扩大,且细胞向损伤部位迁移; 50 d观察损伤范围与35 d相比扩大不明显.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN、NSE、GFAP和CK 的表达有不均一性.检测到的阳性区域视网膜未见到玫瑰花结样结构,但某些区域的细胞排列不整齐,在某些部位有细胞层增生.HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组,ERG b波检测表明5周后损伤移植组的b波水平高于对照组.结论 MSC在视网膜下移植后可与原视网膜结构相融合,检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,但细胞的排列和蛋白表达仍有紊乱.MSC的移植对激光损伤斑及ERG b波的恢复有促进作用.

【关键词】 干细胞视网膜激光

2. 大鼠骨髓间充质干细胞视网膜下移植观察

【中文期刊】 张杰 单清 马萍 姜严明 陈鹏 钱焕文 裴雪涛 

《眼科新进展》 2003年23卷2期 82-85页 被引13次 ISTICPKUCA

【摘要】 目的鉴定骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜下移植后的定位.方法体外培养雄性大鼠MSCs,直接作为细胞供体视网膜下移植于成年雌性大鼠视网膜下,4周后将动物处死,取眼球做石蜡切片,用Y染色体鉴定;为做进一步验证,将MSCs用重组腺相关病毒AAV-gfp感染后移植,分别于4、8周取动物眼球作冰冻切片,于荧光显微镜下做绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)表达观察.结果培养的MSCs集落生长迅速,均一性好;Y染色体原位杂交鉴定表明来源于MSCs的阳性细胞融合入了原来的视网膜结构,在光学显微镜下可分布于视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层;在荧光显微镜下可见GFP标记的阳性细胞存在,分布于视网膜色素上皮层、视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层,细胞形态与结构同周围的视网膜相似;2种标记方法检测到的视网膜结构完整,未见到玫瑰花结样结构.结论 MSCs可在视网膜下移植后4周与原视网膜结构相融合,2种方法检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层.

【关键词】 骨髓间充质干细胞视网膜Y染色体